激光扫描共聚焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscopy, LSCM)是一种基于荧光显微技术的高分辨率成像系统，其核心在于通过“共轭聚焦”原理消除焦外干扰光，结合激光光源和逐点扫描技术实现高精度成像。具体来说，它利用激光束作为激发光源，经照明针孔形成点光源，对样品焦平面进行逐点扫描。只有焦平面上的荧光信号能同时聚焦于探测针孔并被探测器接收，而离焦信号则被阻挡，从而提升图像对比度和分辨率。
关键结构：在传统光学显微镜基础上，LSCM增加了激光光源、扫描装置、检测器以及计算机系统等组件。激光束通过分光镜反射至物镜，聚焦于样品表面，激发的荧光由同一物镜收集，经分光镜导向探测针孔，由光电倍增管等检测器转化为电信号，再通过计算机重建为二维或三维图像。
激光扫描共聚焦显微镜的使用注意事项：
1.样本制备：确保样本经过适当的固定和染色，以增强对比度和荧光信号。控制组织切片的厚度以获得成像效果。使用抗光漂白剂减少荧光信号的衰减。
2.仪器校准：定期校准激光器，确保激光的稳定性和准确性。保持物镜的清洁和校准，以获得成像质量。调整共聚焦孔径以优化信号收集和背景噪声的抑制。
3.操作规范：严格遵守操作规程，避免误操作对仪器造成损坏。在操作过程中，注意保护眼睛和皮肤，避免直接接触激光束。不要随意更改仪器的设置参数，以免影响实验结果的准确性。
4.环境要求：保持实验室的清洁和安静，避免震动和电磁干扰对仪器的影响。控制实验室的温度和湿度在适宜范围内，以确保仪器的正常运行。
5.维护保养：定期对仪器进行维护保养，如清洁镜头、更换耗材等。在使用过程中，如发现仪器出现故障或异常情况，应立即停止使用并及时报告给相关管理人员进行处理。
更新时间：2026-01-27
点击次数：36
当前位置：
